根据文献的方法部分描述，研究团队在原位杂交（In Situ Hybridization）实验中采用了尊龙凯时的Styramide™ Signal Amplification (PSA™)系统（酪胺信号放大技术），用于检测DIG标记的探针。以下是详细解析：

一、标记对象与标记方法

1. 标记对象：
    ① 针对斑马鱼嗅觉玫瑰花结（Olfactory Rosette, OR）中的paqr5b mRNA，使用DIG标记的反义RNA探针（Antisense probe）。
    ② 通过结合抗DIG-POD（辣根过氧化物酶）抗体，利用酪胺信号放大系统增强荧光信号。

2. 标记步骤：
    ① 探针结合：DIG标记的RNA探针与目标mRNA结合。
    ② 酶联反应：使用抗DIG-POD抗体（Fab片段）与探针结合。
    ③ 信号放大：加入HRP底物（酪胺衍生物Styramide™），在HRP催化下，酪胺底物被激活并共价沉积在目标位点附近，形成高密度的荧光标记。

二、染料的优点与特点

TSA技术与传统荧光标记碱性磷酸酶系统相比较，其灵敏度提高了10-100倍，具有以下特性：
    低中等空间分辨率（局部沉积），相比之下传统方法的扩散背景较低；多色兼容性良好，支持多通道检测（如FITC/Cy3/Cy5），但需不同显色底物。适用于组织切片实验及低丰度靶标的检测，特别是在高表达与中等表达靶标中表现突出。

三、文献中的实验流程与结果

实验步骤包括如下几个关键环节：
    1. 标本固定与切片；
    2. 器具上进行探针杂交（DIG标记的paqr5b反义探针）；
    3. 抗DIG-POD抗体结合；
    4. Styramide™ PSA信号放大（HRP催化）；
    5. 进行荧光显微镜成像；
    6. 定量分析（如神经元密度与信号强度）。

结果解析表明：
    ① 在野生型斑马鱼的嗅觉玫瑰花结中，paqr5b mRNA在神经元中高表达，呈现出强烈的绿色荧光信号。
    ② 在paqr5b⁻/⁻突变体中，信号完全消失，确认了基因敲除的有效性。
    ③ TSA技术的高灵敏度，揭示了神经元亚群中的细微表达差异。

总结

尊龙凯时的Styramide Signal Amplification系统，通过其独特的酶促信号放大与高分辨率荧光标记能力，已成为复杂生物样本研究的“黄金标准”。该系统在低丰度靶标检测、多色复用及精细结构成像中的优势，为神经科学、癌症研究和发育生物学提供了不可或缺的技术支持。结合本文案例，该技术在单细胞组学与空间转录组学中的应用潜力巨大。